Buồng đếm tế bào hồng cầu Neubauer (không tráng bạc)

Buồng đếm tế bào hồng cầu Neubauer không tráng bạc là một phiến kính trong, dày, hình chữ nhật. Thiết kế chia làm 3 phần, ở giữa là phần lõm, phẳng, chia làm 2 khoảng nhỏ. Trên mỗi khoảng nhỏ ở phần giữa có kẻ 1 lưới đếm gồm 400 ô vuông nhỏ có tổng diện tích 1mm2, bao gồm 25 ô vuông lớn, mỗi ô vuông lớn gồm 16 ô vuông nhỏ, như vậy buồng đếm có 400 ô vuông nhỏ (16×25).

Diện tích 1 ô vuông nhỏ là 1/400mm2.

Diện tích 1 ô vuông lớn là 1/25mm2.

Buồng đếm có 2 tấm kính (lamel) dày để đậy, rộng 22mm. Độ sâu buồng đếm hồng cầu (tính từ kính đậy tới mặt buồng đếm) là 0.1mm. Thể tích của buồng đếm là 1mm2 x 0.1mm = 0.1mm3.

Cách đếm tế bào bằng buồng đếm Neubauer:

• Bước 1 : Pha loãng mẫu cần đếm sao cho trong mỗi ô nhỏ của buồng đếm có khoảng 5-10 tế bào (không lớn hơn 10 tế bào và nhỏ hơn 2,5 tế bào). Ô lớn từ 10-50 tế bào.
• Bước 2 : Lắc đều ống nghiệm pha loãng mẫu. Dùng Pipet Pasteur hoặc micropipette nhỏ một giọt dung dịch mẫu vào giữa buồng đếm, dùng tay tráng nhẹ buồng đếm để dung dịch mẫu tràn đầy khoang đếm.
• Bước 3 : Đậy lại bằng phiến kính, thao tác tránh bọt khí lọt vào trong phiến kính khi đậy.
• Bước 4 : Đặt buồng đếm lên bàn soi dưới kính hiển vi và chỉnh cửa sập kính hiển vi cho cường độ ánh sáng phù hợp để tiến hành đếm số lượng tế bào. Tùy vào số lượng tế bào mà người dùng có thể đếm tất cả tế bào có trong ô hay chỉ đếm tế các tế bào có trong một số ô vuông lớn đại diện.
• Bước 5 : Bắt đầu đếm tế bào sau khi nhỏ giọt dung dịch từ 3 – 5 phút.

Khu vực đếm:

• Hồng cầu đếm ở 5 khu : 4 khu ở 4 góc và 1 khu chính giữa.
• Tổng thể tích đếm là : 16 x 5 = 80 ô = 80/4000mm³

Quy tắc đếm:

1. Đếm theo hình zizac từ trái qua phải, từ trên xuống dưới.
2. Đếm tất các các hồng cầu nằm bên trong của 16 ô, những hồng cầu nằm cạnh ngoài của 16 ô thì chỉ đếm hồng cầu ở cạnh trên và cạnh trái (và chỉ những hồng cầu nằm vào phía trong ít nhất 1/2)
3. Tổng số hồng cầu ở mỗi khu không được lệch nhau quá 10 hồng cầu.

Công thức tính số lượng tế bào:

Gọi A là số lượng tế bào đếm được trong 80 ô nhỏ. Số lượng tế bào trong 1mm3 được tính theo công thức:

1mm³ = A x 4000 x Độ Pha Loãng / (5 x 16)

Làm sạch và vệ sinh buồng đếm Neubauer:

Sau khi sử dụng người dùng phải rửa sạch buồng đếm ngay, và lau khô bằng giấy lau chuyên dụng tránh làm trầy bề mặt buồng đếm làm giảm chất lượng kết quả và tuổi thọ sản phẩm.